产品知识问答区

线性PEI转染过程的问题手册

1：线性PEI转染的原理

线性PEI的线性结构使得其具有较高的正电性,因此易于高效地包裹各种DNA、RNA分子及质粒形成小的 纳米颗粒 ,从而提高转染效率,当所形成复合物进入细胞以后,其中所含的生理条件下可降解的化学键在细胞内水解,使交联聚合物分解为无细胞毒性的小分子PEI,这样结构的转染试剂在体外应用可以获得高的转染效率和低的细胞毒性。

2:线性PEI和质粒比列是多少

质粒和PEI比列通用基本为1：3，上下可以浮动摸索最好的条件 以下为网络查询到的比较好的比列

3：线性PEI和普通PEI做转染的区别

线性PEI和普通PEI基本都是可以做转染的，只是研究表明普通PEI做转染过程种毒性太大，转染效率没有线性PEI效率高，所以普遍的选取线性PEI来做转染 
 
4：线性PEI分子量对转染的影响
我们一般市面上看到的线性PEI是分子量有2500 ，25000 和40000的，一般来说分子量越大转染效率越高，但同时毒性也越大，所以一般95%以上的客户都选择25000的和40000的

 5：线性PEI分子量25000的和40000的转染的区别
从分子角度来说4万的比25000的多了一些盐酸，
从性质来说4万分子量的线性PEI更容易溶解于水，而分子量25000的基本就需要加热到80度以上才能溶解，
从转染效率来说4万的一般转染效率会更高，而25000的一般转染效率会低一点
从毒性来说4万分子量的一般比25000的要高一些
从转染有效成分来说分子量25000的有效成分更多一些，更划算一些

6：线性PEI分子量25000转染效率没有以前好是什么原因
转染效率和很多因素有关，比如细胞种类，细胞状态，血清，转染试剂，质粒，DNA，还有操作人员有关，这里就只针对线性PEI转染试剂来说，一般碰到这个问题90%以上的都是没有溶解透， 所以溶解透就基本解决90%的问题，另外一个可能就是调节一下PEI和DNA的比列 
 
7：线性PEI分子量25000怎么溶解
将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI(可以煮沸，可以加热，可以加盐酸，可以搅拌），冷却到室温  调整pH值至7.0，用0.22um的滤器过滤消毒，分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃  母液浓度一般是1MG/ML

8：线性PEI分子量40000怎么溶解
将无内毒素的无菌水搅拌直接溶解PEI 调整pH值至7.0，用0.22um的滤器过滤消毒，分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃
注意此过程不需要加热，不需要加盐酸 母液浓度一般是1MG/ML

 9：线性PEI分子量25000溶解后是酸性还是碱性
一般纯水溶解后稍微偏弱碱性，加盐酸溶解后偏酸性。
 
10：线性PEI溶解后保质期多久
  线性PEI溶解分装后可以放4度保存1年左右，尽量不要冰冻保存

11.线性PEI能转染哪些细胞

现在用的比较成熟的都是工业级别的客户，在CHO和293细胞中大量使用，据说瞬时转染后细胞表达量线性PEI优于其他转染试剂  另外一些常规的细胞如HeLA细胞等都有文献报道，基本上是一种广普的转染试剂，但一些干细胞，原代细胞效果可能差很多，但一些体内转染线性PEI优于其他转染试剂，比如转染小鼠，猴子等，因为体细胞可以代谢掉线性PEI

12：起发为什么要做BIOHUB的线性PEI

 首先线性PEI是一个非常好的转染试剂，能为中国人节约很多成本，但P公司却把价格从54美金一直涨到现在的1000美金，为了中国生物产业的安全，起发决定做BIOHUB的线性PEI，并取得了极佳的客户反馈。

13.PEI40000毒性比较大的原因

考虑有两点1是PEI用量太多，2是PEI PH值可能是不对的，你最好是调到7.0，要过十分钟之后再二度测试一下，再测一下使用浓度，最后使用的pH值要7.0。

如需了解更多请咨询产品经理 Lucy 15921799099